ELISA试验中血浆抗凝剂优缺点的比较
除掉或抑制血液中的某些凝血因子,阻止血液凝固的过程称为抗凝。能够阻止血液凝固的化学试剂或物质,成为抗凝剂或抗凝物质。在ELISA试验中,关于血浆样本的收集,需要使用到抗凝剂,一般会建议用2.0%EDTA,1%肝素,3.8%枸橼酸钠。根据待测目标物的性质不同选择不同的抗凝剂。3种抗凝剂的优缺点如下:
1. 枸橼酸钠:
Ca2+有凝血作用,枸橼酸钠能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物,从而阻止血液凝固。配成109mmol/L 的浓度和血液1:9, 106mmol/L 的浓度和血液 1:4。 缺点是血液中溶解度低,抗凝作用较弱。优点则是对凝血因子有很好的保护作用,大部分凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝。
2. 乙二胺四乙酸(EDTA)盐:
与血液中的钙离子结合形成配位化合物,从而阻止血液凝固。15g/L EDTA和血液 1:10。
优点对红细胞和白细胞形态影响小。缺点是影响血小板的聚集。不适用于凝血实验和血小板功能相关实验的检测。
3. 肝素:
通过与抗凝血酶Ⅲ结合,增强抗凝血酶的作用,灭活丝氨酸蛋白酶,从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集,阻止血液凝固。肝素钠 1g/L与血液 1:10。优点抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易溶血、能耐高温。缺点是会引起白细胞聚集。肝素抗凝血应于短时间内使用,否则放置过久血液又可凝固。