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　　华远详解| 抗体如何保存及损坏处理方法

　　保存温度

　　对于我们的许多抗体而言，分装为小等份在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下冻存是*佳的保存条件。分装抗体可以限度减少冻融对抗体造成的损坏，还可避免多次从同一管中移取抗体而引入污染。分装后抗体只可冻融一次，如有剩余，应保存在 4 ℃ 下。

　　收到抗体后，请以 10,000 × g 离心 20 秒，沉降滞留在管盖螺纹中的溶液，然后分装抗体并将其转移至低蛋白质结合的微量离心管中。分装抗体的量取决于您在实验中常用的量。分装抗体应不少于 10 μL;分装抗体量越少，浓度就越容易受到蒸发以及储存样品管表面吸附的影响。

　　在大部分情况下，可在收到抗体之后立即将其保存于 4 ℃ 下，可保存 1 至 2 周。遵循数据表上的保存建议非常重要。

　　特例

　　切勿冻存酶偶联抗体，而应将其保存在 4 ℃ 下。冻融不仅会影响抗体的结合能力，还会降低酶活性。

　　偶联抗体(无论是偶联有荧光染料、酶还是生物素)应保存在深色样品瓶中或用锡箔纸包裹样品瓶。暴露于光下会影响偶联物的活性。荧光偶联物尤其容易发生光致漂白，因此在实验各阶段都应避光保存。

　　IgG3 同型抗体的独特之处在于其解冻后容易形成聚集体，因此应始终保存在 4 ℃ 下。

　　腹水液中可能含有蛋白酶，因此收到后应尽快冻存。

　　​污染

　　为了防止微生物污染，可将叠氮化钠加入抗体制备物中，叠氮化钠的*终浓度为 0.02% (w/v)。我们的多款抗体中都含有这种保护剂，其浓度范围为 0.02%-0.05%。数据表的保存缓冲液部分将对此进行说明。

　　不使用叠氮化钠的情况

　　如果要用抗体对活细胞进行染色或处理，或者要用抗体进行体内研究，请务必使用不含叠氮化钠的制备物。这种抗菌剂对大部分生物体都有毒害作用：它会阻断细胞色素电子传递系统。

　　叠氮化钠会干扰涉及胺基的所有偶联反应，因此必须在进行偶联反应之前将其去除。完成偶联反应之后，可使用叠氮化钠保存抗体。另一种可用的抗菌剂是 0.01% 硫柳汞钠(硫柳汞)，这种物质不含伯胺。

　　抗体溶液中的叠氮化钠可通过渗析或凝胶过滤去除。IgG 的分子量为 150,000 Da(IgM 约为 600,000 Da)，叠氮化钠的分子量为 65 Da。截留分子量为 14,000 Da 的微渗析装置可使叠氮化物顺利扩散出去，而抗体得以保留。

　　渗析过程在烧杯中(置于磁力搅拌器上，温度保持 4 ℃)进行，每毫升抗体使用至少 1 升预冷的 PBS，搅拌渗析装置 6 小时。更换 PBS 两次，每次更换后均搅拌至少 6 小时。如有可能，所有材料都应灭菌，并且应在无菌条件下处理所得制备物。

　　​冻融损坏

　　反复冻融可能使抗体变性，导致抗体形成聚集体，从而降低其结合能力。

　　对大部分抗体而言，在 -20 ℃ 下保存就已足够;在 -80 ℃ 下保存并无明显优势。应避免使用无霜冰箱，因为此类冰箱的冻融循环(用于减少霜的形成)正是保存此类抗体需要避免的。出于相同的原因，应将抗体样品瓶放在冰箱中温度波动*小的区域，例如抵靠冰箱背板放置而不是置于冰箱门架上。

　　有些研究人员向抗体中加入冷冻保护剂甘油(*终浓度为 50%)以防止冻融损坏;甘油可将冷凝点降至 -20 ℃ 以下。虽然这种方法可用于多种抗体，但我们仅对少数几种 Abcam 抗体在这种保存条件下的稳定性进行了测试，我们仅担保遵循数据表建议进行保存的抗体的性能。我们不建议在 -80 ℃ 下保存含甘油的溶液，因为该温度低于甘油的冷凝点。请注意，甘油可能会被细菌污染。如果加入了甘油或任何冷冻保护剂，应当小心操作，确保获得无菌制备物。

　　蛋白质浓度和稳定性

　　将抗体稀释至工作浓度后，在 4 ℃ 下保存不得超过一天。一般而言，以高浓度保存的蛋白质更不易降解，理想浓度是 1 mg/mL 或更高。这就是将蛋白质(如 BSA)作为稳定剂加入抗体溶液的基本原理。加入的蛋白质还能尽可能减少抗体结合到容器壁上造成的损失。请勿向将要进行偶联的抗体中加入蛋白质稳定剂，因为蛋白质稳定剂会与抗体竞争，降低偶联效率。

　　华远详解| 抗体如何保存及损坏处理方法 华远化学公司主要业务为向大专院校、科研机构，药企、化工企业提供高品质、特殊规格的化学产品和技术解决方案，已经形成了累计服务超过1000家客户，提供高规格产品超过6000种，合作行业和产业伙伴超过1200家的体量和规模，积累了丰富的经验和良好的口碑。基于长期的行业经验和积累，我司已经形成了既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能适应企业从小试、中试到规模化等各个阶段的综合需求的核心能力。