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　　华远| HE染色实验技术服务

　　标本要求：

　　1.客户提供人或动物的新鲜或福尔马林固定的组织，我司负责进行石蜡包埋与组织切片

　　2.客户提供人或动物的石蜡包埋组织及处理好的玻片，制备石蜡切片

　　3.细胞涂片、细胞爬片、组织冰冻切片、组织石蜡切片(收费标准请来电咨询)

　　客户须知：

　　1、客户检测蛋白的种属，客户提供实验分组情况及实验背景资料，有具体要求请事先说明

　　2、标本收集与保存：如提供组织块，事先应以10%的福尔马林或4%的多聚甲醛固定(后者同时适合免疫荧光检测)

　　3、样本运输：样本密封完毕，建议以塑料瓶装好标本寄送以免路途损坏;如寄送切片则选择纸盒包装完好，周围加以泡沫或纸巾填塞以免路途损坏，常温寄送即可

　　4、染色完毕后，照相1-2 张/每切片，如需要图片分析请事先说明

　　5、您可自备一抗，也可让我公司代购。为保证质量，抗体最好为进口单克隆抗体

　　一、HE染色简介 苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法 ，石蜡切片技术里常用的染色法之一 。通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法，以达到准确，完整的病理诊断。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

　　二、HE染色目的 病理学的所有切片，都必须通过一种以上的染料，通过各种不同的方法，将切片中各种不同的物质，在不同染液的作用下，将其显示出来，使之在光学显微镜下，能够完全的观看各种结构。例如，HE染色，好质量的切片可以清晰地显示出许多不同的结构，细胞核着蓝黑色，细胞浆着粉红色，软骨着蓝色等。清晰的结构为诊断提供可靠的依据，因此，染色技术也是病理技术中的重要组成部分，必须不断地总结，方能提高。如果染色不好，切片染色一团糟，红蓝不分，结构不清，层次不明，影响了镜下的观察，直接影响了临床诊断，染色结果的好坏直接关系到诊断的准确性。

　　三、HE染色注意事项 标本无论大小离体后均应立即固定。大标本还要按1cm间距剖开，加足固定液。固定液的量一般为标本体积的10倍。固定液的种类较多，适合常规HE切片的固定液首选10%福尔马林。固定时间应大于8小时，之后再取材。取材后再用95%酒精(Alcohol)85ml+冰醋酸(Acidaceti) 5ml+福尔马林 (Formalin) 10ml ( 简称AAF 液) 补充固定1~2 小时。组织固定必须彻底以免影响脱水、切片、染色和镜检。取材的刀剪要锋利，避免在取材时用力夹、锯、压使组织变形。组织大小一般为1.5cm×1.5cm，厚薄在0.2~0.3cm，细胞丰富的组织如淋巴结要小于0.2cm。形状要规则平整，故新鲜标本不宜立即取材。如遇到骨或钙化组织需脱钙处理。脱钙后一定要除酸( 将组织放入2%氢氧化钠溶液中10分钟，流水冲洗10分钟即可)。

　　四、操作步骤 以石蜡切片为例，HE染色石蜡切片制作的基本过程 1、取材与固定 2、脱水透明 3、浸蜡包埋 4、切片与贴片 5、脱蜡染色 五、染色结果 细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。

　　华远| HE染色实验技术服务 华远公司主要业务为向大专院校、科研机构，药企、化工企业提供高品质、特殊规格的化学产品和技术解决方案，已经形成了累计服务超过1000家客户，提供高规格产品超过6000种，合作行业和产业伙伴超过1200家的体量和规模，积累了丰富的经验和良好的口碑。基于长期的行业经验和积累，我司已经形成了既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能适应企业从小试、中试到规模化等各个阶段的综合需求的核心能力