单纯疱疹病毒 I 型荧光定量 PCR 检测试剂盒(染料法)

　　标签：PCR检测试剂盒华远化学聚合酶

　　单纯疱疹病毒 I 型荧光定量 PCR 检测试剂盒(染料法)产品及特点单纯疱疹病毒(Herpes Simple Viruses， HSV)属于疱疹病毒科 a 病毒亚科，为双股 DNA 病毒，疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。对人的感染通过人与人接触传染。根据抗原性的差别目前把 HSV 分为 1 型和 2 型。1 型主要由口唇病灶获得，2 型可从生殖器病灶分离到。从发生后四个月到数年被感染的人数可达人口总数的 50-90%，是*易感染人的一种病毒。因此对 HSV-1 的快速诊断具有重要的意义。本产品就是根据 HSV-1 保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR产品。

　　试剂盒特点：

　　1.根据 HSV-1 的 gD 基因设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。

　　2.灵敏度比常规 PCR 高 2-3 个数量级，可以达到几百拷贝/反应。

　　3.即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。

　　4.一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。

　　5.本试剂盒足够 100 次 20uL 反应体系的荧光定量 PCR。

　　6.本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

规格及成分		成分	编号	十孔盒包装（去纸托）
		2×qPCR MagicMix	90408	1 mL（棕色，装 A 袋）
		超纯水	100935	1 mL（红盖，装 A 袋）
		引物 11-180802F	11-180802f	1 OD（本色，装 B 袋）
		引物 11-180802R	11-180802r	1 OD（本色，装 B 袋）
		HSV-1 阳性对照 (1×10E8 copy/μL)	11-180802pc	50 μL（白盖，装 C 袋）
		DNA 病毒裂解液（试用装）	3674a	15 次（9 mL）
		使用手册	11-180802sc	1 份
运输及保存	低温运输、-20℃保存(A 袋和 B 袋的试剂放样品准备区、C 袋的阳性对照*好分开放置)，有效期一年。
自备试剂	DNA 模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
使用方法	一、样品 DNA 的制备 1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。二、引物的制备（在样品制备室进行）

2.按引物标签提示在装引物干粉的管中直接加入适量的超纯水（加入量见引物试管上的标签），使得两条引物的浓度均为 10μM（10 pmol/μL），然后各取 110μL 混合在一起得 220μL，标注为引物混合物，放冰上待用。220μL 足够 100 次 qPCR 反应。

三、稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 52bp 的 DNA 片段作为阳性对照。

3.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。

4.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。

5.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

6.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

7.换枪头，从 6 号管中取 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

8.换枪头，从 5 号管中取 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

9.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。 三、设置 qPCR 反应（20 μL 体系，在样品制备室进行）

10. 在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）：

成分	样品	阴性对照	阳性对照（2-7 管）
2×qPCR MagicMix	10 μL	10 μL	各 10 μL
引物混合物	2 μL	2 μL	各 2 μL
自备 10×ROX (见注)	2 μL	2 μL	各 2 μL
待测样品 DNA 模板	1-5 μL	不加	不加
阳性对照（2-7 号）	不加	不加	各 5μL（2 号样到 2 号管，3 号样到 3 号管…）
补水到	20 μL	20 μL	20 μL

注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照，其他荧光 PCR 仪

　　单纯疱疹病毒 I 型荧光定量 PCR 检测试剂盒(染料法)华远公司主要业务为向大专院校、科研机构，药企、化工企业提供高品质、特殊规格的化学产品和技术解决方案，已经形成了累计服务超过1000家客户，提供高规格产品超过6000种，合作行业和产业伙伴超过1200家的体量和规模，积累了丰富的经验和良好的口碑。基于长期的行业经验和积累，我司已经形成了既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能适应企业从小试、中试到规模化等各个阶段的综合需求的核心能力。