发布时间:2022-10-24 11:31:00

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  动物血清的正确热灭活方法

 

  胎牛血清,顾名思义是在腹中待产的未出生小牛为胎牛,通过穿刺抽血得到的血清为胎牛血清;新生牛血清,则是刚刚出生的小牛,无菌采血所得到的血清为新生牛血清,出生时间可以12个小时、24小时甚至几天内的等等。正是因为采血时间的不同,致使两种血清很多组分(多种生长因子和蛋白)都存在差别,实际应用中在细胞培养实验尤其明显。

  牛血清是一种成分复杂的混合物,其大部分成分已为人所知,但还有一部分仍不清楚,而且血清的组成及含量通常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而存在差异。牛血清主要成分有以下几类:

  1、蛋白质类:包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白、胎球蛋白、转铁蛋白、纤维粘连素等。

  2、多肽类:主要是一些促进细胞生长和分裂的生长因子,最主要的生长因子是血小板生长因子,还有成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,虽然在血清中含量很少,但对细胞的生长和分裂也起着重要作用。

  3、激素类:激素对细胞的作用是多方面的。包括胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关;类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用:促生长激素:促进细胞增殖的效应;氢化可的松:血清中含有微量该成分,它可能具有促细胞贴附和增殖作用。但有人证明,血清中的氢化可的松,在细胞密度较高时可能有抑制细胞生长和诱导细胞发生分化的作用。

  4、其他成分:如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培养基中这些成分的作用并不明显,与蛋白相结合的微量元素对细胞生长起促进作用。

  动物血清的热灭活非常容易造成蛋白析出增多,若非必要,可以无需做此操作。若必须做动物血清的热灭活,请严格遵守以下步骤:

  1、保证血清完全融化状态,温度接近常温。

  2、保证水浴温度56℃、30分钟的原则,在水浴过程中每隔2-3分钟摇晃瓶子,使血清内部受热均匀,直至灭活时间结束。

  注意事项:

  温度过高、时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多,甚至严重影响血清的品质。在56℃水浴中,持续恒温30分钟。在此过程中每隔2-3分钟摇晃瓶子,使其受热均匀,减少蛋白的析出。

  动物血清的正确热灭活方法华远公司主要业务为向大专院校、科研机构,药企、化工企业提供高品质、特殊规格的化学产品和技术解决方案,已经形成了累计服务超过1000家客户,提供高规格产品超过6000种,合作行业和产业伙伴超过1200家的体量和规模,积累了丰富的经验和良好的口碑。基于长期的行业经验和积累,我司已经形成了既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能适应企业从小试、中试到规模化等各个阶段的综合需求的核心能力。公司在技术理念、产品研发、产品合成、产品分析、质量检测、产品存储、产品包装等相关领域,都形成了相对成熟领先的自有体系。

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