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　　华远解析实验原理区别：蛋白检测用WB还是ELISA

　　检测蛋白的实验有很多种,WB实验和ELISA实验是比较常用的两种实验方法,这两种方法哪一种的实验结果更为可靠呢?有些人说ELISA自己包被抗体的话会比较麻烦，WB相比更加科学，容易被杂志接纳。但是血清中没有内参可以选择。是不是ELISA实验操作要简单很多，那么又如何来解决这样的一个问题呢?华远化学为您解答这个疑惑。

　　WB 只能定性，半定量。

　　ELISA 可用定量方法检测蛋白,也就是说你可以观察不同浓度刺激物对目的蛋白的影响。

　　WB所检测的一般是抗原，而Elisa抗原抗体都可以检测。

　　WB所检测的抗原可以知道其分子量的大小，或是否是多聚体、降解产物等。

　　一般Elisa的灵敏度要远高于WB，这从一般酶标记物的使用浓度或待检样品的稀释度上就可以看出。

　　WB一次样本量就是一块胶，10-20个样品最多了。Elisa一块96孔板一次可以处理96个样本，可以设置多个复孔、对照、梯度样等来提高检测的可信度。

　　WB实验时间时间更长，操作更繁琐。Elisa 有很多现成的试剂盒，按照说明书操作即可。

　　一、WB和ELISA的敏感性有所区别。虽然前者用ECL显色敏感度可达pg级，但不同的样品来源和抗体的质量，不能保证每次都到这个级别;而ELISA可以达到ng级。也就是说ELISA更适于丰度低的蛋白检测。而且由于ELISA检测所用的样品少，也适用于样品来源有限的蛋白浓度检测。

　　二、在定量方面，ELISA一般用于定性，定量也可， WB可以做到半定量。

　　三、ELISA不如WB的特异性好。

　　四、关于血清内因子的检测，如果WB检得出就不要用ELISA。血清内参的问题，在ELISA里也一样存在。操作来说ELISA当然简单，但由于两种方法各有优点，不能全面相互代替。

　　ELISA:

　　优点：灵敏，能够定量(有标准品的情况下)

　　缺点：需要购买试剂盒(自己做试剂盒的话建议您放弃)，价格昂贵(双抗夹心法需要两个抗体，当然贵啊)，而且需要排除假阳性假阴性的问题，需要考虑的问题较多。此外就是发文章没有图片不太好看(呵呵，自己的感觉)

　　WB：

　　优点：试剂便宜，认同度高，发文章没有问题，如果用高灵敏度的发光试剂盒也可以达到非常高的灵敏度

　　缺点：操作步骤较多，如果实验室没有成熟的条件，想开展起来需要花一些功夫，分子量很大(个人认为>200kD)和很小(<5kD)的目的蛋白比较麻烦。

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