华远分享：免疫荧光染色的染料需具备的条件

　　用于免疫荧光染色的染料需具备以下几个条件：

　　1、荧光染料应有较高的量子产额和消光系数;

　　2、荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收;

　　3、发射光波长与激发光波长之间应有较大的波长差;

　　4、容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。

　　1.异硫氰酸荧光素(FITC)：可产生亮绿色荧光。FITC是免疫荧光标记最常用的荧光探针。

　　2.德州红：与生物素偶联的抗体有很强的亲和力，产生红色荧光。

　　3.藻胆蛋白类：主要包括藻红蛋白(PE)、藻青蛋白(PC)、别藻青蛋白(APC)三类。多发生橙色至红色荧光。

　　4.能量传递复合染料

　　免疫荧光用什么封闭比较好?

　　可以使用无蛋白封闭液 PW040 PW041 PW042，

　　血清封闭：组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合，造成后续结果的假阳性;封闭血清一般是和二抗同一来源的，血清中动物自身的抗体，预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合;也可以用小牛血清、BSA、羊血清等，但不能与一抗来源一致。

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