标签：标记抗体 华远化学 蛋白 生物试剂

　　华远教您如何正确使用标记抗体及蛋白?

　　华远化学详解：标记抗体是一个分子量只有244.31Da的小分子，经活化后可与蛋白、抗体等生物大分子结合，不仅可以很好地保持大分子的生物活性，而且与亲和素结合使用时具有多级放大作用，使其广泛应用于微量抗原、抗体定性、定量检测及定位观察研究。

　　那么如何使用生物su标记抗体或蛋白呢?下面华远小编给大家分享一下。

　　工具/原料

　　1.10ul，50ul，200ul，1000ul可调移液器

　　2.恒温箱(37℃)

　　3.离心机(离心力可达到12,000×g)

　　4.生物su标记试剂盒(Cata.No:EBLK0002,Elabscience)

　　华远小编详解实验前准备

　　1.仔细阅读使用说明书。

　　2.计算待使用NH2-Reactive Biotin的量。

　　3.提前20min从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温(注：不需要用到的NH2-Reactive Biotin继续放置冰箱中)。

　　4.溶解NH2-Reactive Biotin：加入30ulDMF至NH2-ReactiveBiotin瓶中，静置10min，待其充分溶解，此时生物su的浓度为10mM。

　　操作步骤：(本操作步骤按照1mg的量进行标记)

　　1.取1mg待标记抗体于Filtration tube中，并加入相应体积的Labeling Buffer，使抗体的终浓度为2mg/ml，12,000 x g离心10min。(注：①Filtration tube的大体积为0.5ml②待标记抗体浓度低时，可先超滤离心一次)

　　2.加入13.3ul NH2-Reactive Biotin和适量Labeling Buffer至上述Filtration tube中，使终体积为0.5ml，并轻轻吹打混匀。放入37℃恒温箱中避光温育30min。12,000 x g离心10min。

　　3.加入适量Labeling Buffer至上述Filtration tube中，使终体积为0.5ml，并轻轻吹打混匀，12,000 x g离心10min。

　　4.操作3重复一次。

　　5.加0.2ml Labeling Buffer至Filtration tube中，轻轻吹打。将滤芯倒转放置于另一个离心管中，6,000 x g离心10min。

　　6.收集离心管中的溶液，即为生物su标记的抗体。

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