华远解析:让细胞活泼的诀窍你了解吗
1. 保证所有试验室材料都无菌
穿插污染是细胞培育的大敌。即使是细微的污染,也可能毁了几个星期的成果。因培育箱内温暖潮湿,真菌极易成长,因而有必要注意定时清洁。此外,在将培育瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前,应用酒精擦拭干净,以防止污染。
2. 当心处理您的培育物
细胞培育的脆弱性怎样着重也不为过。剧烈摇晃,或连续的温度动摇可能会对成长产生不利的影响。保证培育箱是水平的,温度均一,且远离电动仪器。此外,尽量防止一次处理多个细胞系,由于它可能会影响细胞的基因型和表型。您还应定时完结STR图谱剖析,以确认细胞系的身份。
3. 在运用前正确冻结细胞
虽然冻结看起来是个简单的步骤,但有必要操作妥当,以免伤害细胞。长期暴露在高温条件下会使细胞无法铺板。因而,冻存管应当在37°C水浴中放置2分钟,然后用条件培育基稀释,以防止DMSO造成直接伤害。
4. 运用对数成长期的细胞
细胞培育进程共有3个阶段:停滞期、对数期和渠道期,别离代表了低细胞成长、高细胞成长和无细胞成长。活力的细胞是健康的,快速割裂的,在对数期以70-80%的集合度存在。
5. 在传代之前不要让细胞*集合
集合度是指贴壁细胞占有培育瓶表面积的份额。*集合意味着100%的表面都被贴壁细胞覆盖。一定要防止这种状况,由于它意味着细胞不能持续成长。不过,燃眉之急是运用活泼成长的细胞。
6. 挑选细胞的培育基开发战略
在细胞培育进程中,培育基是控制产品质量、产量和成本的重要因素。有必要针对每种培育物来定制培育基,以优化试验结果。在决定以哪种方法来开发您的培育基时,您有几个挑选。
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