华远小讲堂：该怎样挑选适宜的HA标签抗体?

　　HA标签抗体：

　　HA 标签(氨基酸序列：YPYDVPDYA)是一段来源于人流感病毒血凝素(HA)蛋白第 98～106 位氨基酸的短序列。HA 标签的分子量为 1.1 KDa，是目前广泛应用的表位标签之一。 通过分子生物学手段将 HA 标签融合到目的蛋白的 C 端或 N 端后，抗 HA 标签抗体可用于 HA 标记的靶蛋白的检测、分离和纯化，而无需蛋白特异性抗体或探针。

　　HA标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛使用于多种细胞类型，相应的HA标签抗体也被广泛使用。HA 标签抗体能特异识别C结尾或N结尾带有HA标签(HA-tagged)的交融蛋白，也能够用于检测和HA tag交融表达蛋白的表达、细胞内ding位，以及纯化、定性或定量检测HA tag交融表达蛋白等。

　　挑选适宜HA标签抗体需求考虑的要素

　　我们在挑选一个标签抗体时，首要根据自己实验使用上的需求。这儿需求考虑的要素包含，HA抗体的使用检测类型、HA抗体的克隆性及制备来历等。比方该HA抗体是否能用于免疫荧光IF的检测?是否能够用于Western Bloting和免疫沉淀IP实验?是否需求HRP偶联的单克隆HA标签抗体?还是一个兔来历的HA多抗更适宜?

　　一般来说，使用类型越多，在使用过程中的挑选地步就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性都要优于多克隆抗体，而多克隆。别的，抗体的效价也是调查该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际使用时的稀释比率。

　　一个效价高的100μl HA抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5000，终究使用液相当于500ml)，要比效价低的1ml的HA抗体(假如WB检测的稀释比率是 1:200，终究使用液相当于200ml)性价比更高。

　　因此在挑选抗体的时分，不但需求考虑抗体的量，还需求考虑抗体的效价，即不同使用的主张稀释比率。

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