双抗夹心ELISA试剂盒的步骤是什么?

　　(1)单抗包被-抗原-酶标二抗-底物显色。

　　ELISA试剂盒本法首先也是用特异性抗体包被于固相载体，经洗涤后加入含有抗原之待测样品，如待检样品中有相应抗原存在，即可与包被于固相载体上的特异性抗体结合，经保温孵育洗涤后，即可加入酶标记特异性抗体，再经孵育洗涤后，加底物显色进行测定，底物降解的量即为欲测抗原的量。

　　(2)单抗包被-抗原-二抗-酶标二抗-底物显色。(改良双抗体夹心法)

　　本法首先是将特异性抗体a包被于固相载体，经洗涤加入含有欲测抗原之待检样品。

　　ELISA试剂盒 经孵育洗涤后再加一次未标记的特异性抗体b，

　　而这次加入的抗体b于*次包被于固相载体上的特异性抗体a对被测抗原来说都是特异性的，

　　但不是用同种动物免疫制备的，否则可出现非特异性反应。

　　经孵育洗涤后，再加酶标记抗b抗体，再经孵育洗涤后加底物显色进行测定。

　　这种方法与双抗体夹心法不同之处是多加了一层抗体。

　　因此，放大的倍数更高，故比双抗体夹心法更加灵敏。

　　ELISA试剂盒 同时避免标记特异性抗体，而另一优点是只要标记一种抗抗体，即可达到多种应用。

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