【华远化学】胎牛血清的应用
动物细胞培养技术的发展极大的推动了现阶段生物医药产业的发展,此类技术目前被广泛应用于单克隆抗体的制备、重组蛋白药物的研发、人造器官移植、基因工程等行业,成为了生物制药领域的关键技术之一。
因为胎牛血清提供了细胞生长所需的贴壁因子、免疫球蛋白、氨基酸、脂肪酸等其他营养成分及细胞因子,为细胞的生长和维持提供了必要的活性成分,并且血清可以提供蛋白抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害,对细胞培养的意义重大。
无论是在单克隆抗体、ADC、细胞免疫治疗或者是疫苗生产过程中都会用到胎牛血清培养细胞,以常见的293T细胞培养为例。其作为哺乳类细胞的筛选以及稳定性表达细胞系,广泛应用于生物医药各个方面,南京森贝伽生物科技独立研发部门对于293T细胞培育至15代,并筛选出最适用的培育方案。
培养条件:RPMI 1640培养基(BC-M-017-500mL) + 10% Fetal Bovine Serum(BC-SE-FBS01-500mL)
细胞复苏:将含有1ml细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5ml培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心3min,弃去上清液,补加4-6ml完全培养基吹匀。然后将细胞悬液加入培养瓶中过夜,第二天检查细胞密度并换液。
细胞传代:当细胞镜下观察汇合度达到80%-90%时,即可进行传代培养。弃去弃去培养液上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞2次。加1-2ml胰酶消化液(0.05%Trypsin-EDTA)(BC-CE-001-100mL)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,镜下观察细胞大部分圆缩并脱落,肉眼观察细胞培养瓶上部细胞呈挂线状滑落,迅速拿回操作台,于手心轻敲几下培养瓶,可见细胞呈沙粒状滑落,加5ml以上完全培养基终止消化。轻轻吹打细胞,完全脱落分散后吸出,在1000RPM条件下离心3min,弃去上清液,补加1-2ml吹匀。按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞重悬按1:2到1:4的比例分到新的培养瓶中。放入37℃、5%CO2细胞培养箱中,传代结束。
胎牛血清 华远公司主要业务为向大专院校、科研机构,药企、化工企业提供高品质、特殊规格的化学产品和技术解决方案,已经形成了累计服务超过1000家客户,提供高规格产品超过6000种,合作行业和产业伙伴超过1200家的体量和规模,积累了丰富的经验和良好的口碑。基于长期的行业经验和积累,我司已经形成了既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能适应企业从小试、中试到规模化等各个阶段的综合需求的核心能力。