Russell改良Movat五色套染试剂盒使用说明书

　　一、Russell改良Movat五色套染试剂盒简介

　　弹力纤维呈黑色,胶原蛋白、网状纤维呈黄色,背景呈蓝色,纤维素呈深红色,肌肉呈红色。弹力纤维分化一般2-4分钟。主要由阿利新蓝染液、苏木素溶液、氯化铁、硫代硫酸钠、藏红花等组成。结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维。结缔组织染色方法亦有很多种，如Masson三色染色法、Van Gieson染色法、Gomori氨银法、Mallory磷钨酸苏木素染色，然而以上染色方法只是侧重于某一两种组织的染色。 Russell改良Movat五色套染以其染色丰富、鲜艳而大受欢迎。该染色法主要用于显示动脉粥样硬化斑块。Weigert苏木素用于染细胞核，藏红品红用于染细胞质，藏红花染胶原组织，阿尔辛蓝染基质(蛋白聚糖)。由于该试剂盒操作过程复杂，其染色效果跟操作者经验和数量程度有很大关系，所以同时染出十分满意的结果并不容易。

　　二、Russell改良Movat五色套染试剂盒用途

　　显示多种组织：网状纤维、纤维素、胶原蛋白、弹力纤维等。 Component SBJ-0366S 9×50ml Store at

　　试剂(A):海波溶液 50ml 室温

　　试剂(B):阿利新蓝染色液 50ml 4℃，避光

　　试剂(C):碱性乙醇溶液 50ml 室温

　　试剂(D):Weigert苏木素染色液 D1:Weigert A 30ml 室温，避光 D2:Weigert B 20ml 室温，避光 D3:Weigert C 10ml 室温，避光 临用时,按D1:D2:D3=3:2:1混合即为Weigert苏木素，不可预先配制。

　　试剂(E):藏红品红染色液 E1:藏红品红A 40ml 室温，避光 E2:藏红品红B 10ml 室温，避光 临用时,按E1:E2=4:1混合即为藏红品红染色液，不可预先配制。

　　试剂(F):磷钨酸溶液 50ml 室温，避光

　　试剂(G):弱酸分化液 50ml 室温 试剂(H):醇藏红花染色液 50ml 室温，避光

　　试剂(I):Bouin固定液 250ml 室温，避光

　　四、使用方法

　　1、石蜡切片常规脱蜡，系列乙醇水化。

　　2、取适量Bouin固定液放入微波炉中，中度加热30～60s,立即放入切片处理10min。

　　3、流水冲洗10min。

　　4、切片入海波溶液处理5min,蒸馏水冲洗2～3次。

　　5、切片入阿利新蓝染色液中染色20min，流水冲洗2～5min。

　　6、用微波炉强火45～60℃预热碱性乙醇溶液后,将切片入碱性乙醇溶液中处理10min。

　　7、流水冲洗2～5min。

　　8、切片入预先配制好的试剂(D)-Weigert苏木素染色液中,避光染色60min。

　　9、流水稍冲洗,蒸馏水冲洗2～3次,每次3～5min。

　　10、切片入预先配制好的试剂(E)-藏红品红染色液中,避光染色1min。

　　11、蒸馏水冲洗2～3次,每次3～5min。

　　12、将切片入磷钨酸溶液中处理5min，直接转入弱酸分化液中处理5min。

　　13、蒸馏水冲洗2～3次,每次3～5min。

　　14、脱水:95%乙醇1min,100%乙醇2次,每次1min。

　　15、将切片入藏红花染色液中，染色5min。

　　16、脱水:无水乙醇2次,每次1min。二甲苯透明,覆盖玻片。

　　五、染色结果 细胞核和弹力纤维黑色 胶原蛋白和网状纤维黄色 蛋白聚糖蓝绿色 类纤维素、纤维素深红色 心肌平滑肌红色 泡沫细胞紫色

　　【注意事项】

　　1、由于染色力以及组织切片等原因，染色后未必显示出全部五种颜色。注意做防脱片处理。

　　2、切片厚度一般要求5μm左右，弹力纤维分化通常在2～3min内完成。

　　3、流水冲洗以除去Weigert苏木素染色液非常重要，若冲洗失败会抑制后续的染色步骤。

　　4、这种染色法可显示新型隐球菌，将其染成亮蓝色。

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