金黄色葡萄球菌核酸快速检测试剂盒使用说明书(使用前请详细阅读本说明书)
【产品名称】
2. 高速离心机，样品的前处理需要用高速离心机做分离。通用名称:金黄色葡萄球菌核酸快速检测试剂盒
【样品富集】
英文名称:Rapid Detection kit for Staphylococcus aureus
1. 样品前处理:取 25g 待检样品置于 225 mL 7.5%氯化
【包装规格】24 测试/盒
钠胰酪胨大豆肉汤中，前增菌 10-12h，对增菌液中的
【产品编号】KJD04L菌体富集用于 LAMP 快速检测。
【产品简介】
2.适用样品类型:增菌液或者可疑菌落样品。本试剂盒基于环介导的恒温扩增技术(Loop-mediated
3. 待测样品存放:粗提的待检 DNA 样品保存于-4~0℃，isothermal amplification，LAMP)，用于食品中金黄色葡萄不应该超过 24 h;利用试剂盒提取的 DNA 样品可在球菌的快速检测，可借助显色指示剂直接判读结果。-20C长期保存，但应避免反复冻融。
【检测原理】
【使用指南】
利用两对特殊引物和具有链置换活性的 Bst DNA 聚合
1. 样品前处理酶，使模板两端引物结合处循环出现环状单链结构，引物A. 样品增菌液模板 DNA 的制备:顺利与模板结合并进行链置换扩增反应，实现在恒温条件a) 在检测食品中金黄色葡萄球菌时，吸增菌液1mL 到下(60-65℃)进行连续快速扩增。反应加入显色指示剂，1.5 mL 规格的无菌离心管中，6000 r/min 离心 5 min，阴阳性结果显色差异显著，可直接通过颜色变化判读结果。弃上清,用50 uL无菌超纯水悬浮洗涤沉淀1-2次,6000
【产品特点】
r/min 离心5 min，完全去除上清;
1. 快速简便:将酶、引物等反应组分混匀后进行干粉化 b) 加入30pL 裂解液，充分悬浮菌体，轻弹管壁消除气处理，增加试剂稳定性，使用时减少溶液配制步骤，泡，99℃加热 10 min。更为便捷，整个检测反应可在 1h内完成;c) 12000 r/min 离心 15 min，上清即为粗提的 DNA，可转
2. 特异性高:利用靶基因序列上的多个独立区域设计多移至 0.2 mL 无菌离心管中，在-20℃下可长期保存。条引物，保证扩增反应的高度特异性;
B. 可疑菌落模板 DNA 的制备:
3. 灵敏度高:最低检验限达到 15 CFU/Test;挑取可疑菌落，悬浮到含 30 uL 裂解液的无菌离心管
4. 判读简单:反应前加入显色指示剂，反应后通过肉眼中，后按照上述步骤 b)、c)操作。观察反应液颜色变化或者经荧光监测仪器跟踪荧光图
2. 阴、阳性对照和干粉试剂复溶谱的变化判读结果，直观方便，且可有效避免反应后
A. 阴、阳性对照复溶开盖造成的气溶胶污染。首次使用时，加入 80 uL 超纯水至阳性对照和阴性对
【产品组分】
照冻干粉中，待溶解后混匀，-20℃存储待用。
组分编号
组分名称
规格x数量B. 干粉试剂复溶
检测试剂(冻干)3排x8管取出冻干粉试剂，按照需求剪取n个检测试剂管(n
复溶液650 uLx1 管待检测样品数+1 管阳性对照+1 管阴性对照)，每管加入 201 管
阳性对照(冻干)uL 复溶液，完全溶解后待用。
阴性对照(冻干)1管3. 扩增反应
裂解液1mLx1管A. 打开能够提供恒温条件的仪器，设置到 61℃待用:
显色指示剂80pLx1 管B. 向上述已加入复溶液的n个反应管中各加入显色指示
超纯水1 mLx1 管剂 2.5 uL;说明书1份
C. 向上述已加入复溶液的n个反应管中分别加入待测样品核酸、阴性对照、阳性对照各 2.5 uL，盖紧盖子;
【储存条件与保质期】
D. 将所有的反应管置于恒温仪器中，恒温 61℃反应 502~8℃条件下储存，有效期为 12 个月
【适用仪器】
4. 结果判读
1. PCR仪器或金属浴恒温器,如果检测样品为DNA 样品,水浴锅即可。反应结束后，建议在自然光线充足的环境条件下。
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