华远新闻快讯—抗甲状腺球蛋白抗体TGA的检测方法

　　甲亢、慢性甲状腺炎、甲减具有自身免疫病的性质。在这些疾病的患者中，常可测出循环抗甲状腺抗体，如抗甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulinantibodyTGA)、抗甲状腺微粒体抗体(thyromicrosomalantibodyTMA)、抗第二胶原抗体、抗甲状腺细胞膜抗体、甲状腺刺激抗体。前二者在临床实验中应用zui广，诊断价值也较大。

　　应用RIA检测TGA敏感性甚高，且现已有试剂盒供应，操作简便、快速，样品可直接测定。但由于条件所限，目前常用的还是IFF和ELISA法。在纯化TG的基础上，进行ELISA法则具有敏感、特异、快速、简便、可批量检测等优点。特介绍如下。

　　1.甲状腺球蛋白的纯化 将手术摘除的甲状腺洗净，—30℃冻存，取出后在冻结状态下用刀削成薄片，加2倍量生理盐水于4~C浸泡过夜(切勿搅拌)。收集浸液，同法再浸泡1次。将2次浸液合并，加硫酸铵使达37%饱和度，4℃静置1～2h，离心除去沉淀。上清内继续加硫酸铵使达42%饱和度，4~C静置2h，2000r/rain离心20rain，收集沉淀物，溶于0.01mol/L，pH7.2PBS中，即为粗提TG。将粗提TG用SephadexG-200柱作凝胶过滤，PBS洗脱，收集*蛋白峰，混合，即为纯化的TG。如疑残留有白蛋白，可再流穿抗人全血清-Sepharose4B亲和层析柱。

　　2.操作步骤 用纯化TG(10—50pg/mL)包被聚苯乙烯微孔板，每孔0.1mL，37~C1h后，4℃过夜;洗涤(每次3min，共3次，以下同)后加1：10稀释待测血清，每孔0.1mL，设复孔。37%，2h(或45cC，1h)后洗涤;每孔加HRP标记的TG(zui适工作浓度用方阵法滴定)0.ImL，37~C，2h(或45℃，1h)后洗涤;每孔加OPD-U202底物0，lmL，37~C避光反应15—20min显色后，加0.05mL2mol/LH2S04终止反应。目测呈色程度，或用酶标仪检测492nm吸光度，计算复孔均值。

　　3.结果观察 目测呈色深浅与标准品孔比较，判定是否为阳性。P/N值大于或等于2.1判为阳性。

　　4.临床意义 血清TGA是诊断甲状腺自身免疫疾病的一个特异性指标。大约60%甲亢，80%—90%慢性甲状腺炎患者TGA表现为强阳性。TGA阳性者倾向于诊断为慢性淋巴细胞性甲状腺炎，而较少考虑甲状腺肿瘤，故可作为甲状腺肿块的鉴别。

　　抗甲状腺球蛋白抗体TGA 华远主要业务为向大专院校、科研机构，药企、化工企业提供高品质、特殊规格的化学产品和技术解决方案，已经形成了累计服务超过1000家客户，提供高规格产品超过6000种，合作行业和产业伙伴超过1200家的体量和规模，积累了丰富的经验和良好的口碑。基于长期的行业经验和积累，我司已经形成了既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能适应企业从小试、中试到规模化等各个阶段的综合需求的核心能力。